Implementación de un sistema de telediagnóstico de tuberculosis y determinación de multidrogorresistencia basada en el método MODS en Trujillo, Perú / Implementation of a telediagnostic system for tuberculosis and determination of multi-drug resistance based in the MODS method in Trujillo, Peru

Objetivos. Implementar un sistema para el diagnóstico remoto de tuberculosis y multidrogorresistencia (MDR) usando el método Microscopic-Observation Drug Susceptibility Assay (MODS) en el Laboratorio de Micobacterias del Centro de Excelencia en Tuberculosis de Trujillo (CENEX-Trujillo). El sistema incluyó una variante de un algoritmo de reconocimiento de Mycobacterium tuberculosis recientemente reportado a partir de imágenes digitales de cultivos MODS de muestras de esputo. Materiales y métodos. Se optimizó un algoritmo de reconocimiento por medio de un reentrenamiento del modelo estadístico basado en imágenes digitales de cultivos MODS provenientes del Laboratorio de Micobacterias del CENEX-Trujillo. Se obtuvieron imágenes de 50 cultivos MODS positivos de pacientes con sospecha de tuberculosis multidrogorresistente entre enero y octubre de 2012 en el CENEX-Trujillo. Resultados. La sensibilidad y la especificidad en objetos, para reconocer cordones de tuberculosis fueron de 92,04% y de 94,93% respectivamente. La sensibilidad y la especificidad en foto, para determinar un campo positivo a tuberculoisis fueron 95,4% y de 98,07% respectivamente. Conclusiones. Los resultados demostraron la factibilidad de la implementación de telediagnóstico en lugares remotos, el cual puede contribuir con la detección temprana de tuberculosis multidrogorresistente mediante el método MODS...

Objectives. To implement a system for remote diagnosis of tuberculosis and multidrug resistance (MDR) using the Microscopic-Observation Drug Susceptibility Assay (MODS) method in the Mycobacteria Laboratory, Trujillo Center of Excellence in Tuberculosis (CENEX-Trujillo). The system included a variant of an algorithm for recognition of Mycobacterium tuberculosis recently reported from digital images of MODS cultures of sputum samples. Materials and methods. The recognition algorithm was optimized using a retraining statistical model based on digital images of MODS cultures from CENEX-Trujillo. Images of 50 positive MODS cultures of patients with suspected multidrug-resistant tuberculosis were obtained between January and October 2012 in the CENEX-Trujillo. Results. The sensitivity and specificity to recognize strings of tuberculosis were 92.04% and 94.93% respectively using objects. The sensitivity and specificity to determine a positive tuberculosis field were 95.4% and 98.07% respectively using pictures. Conclusions. The results demonstrated the feasibility of the implementation of telediagnostics in remote locations, which may contribute to the early detection of multidrug-resistant tuberculosis by MODS method...

Cisteínoproteasas Catepsinas L de Taenia solium: Rol biológico en la infección y potencial uso para el inmunodiagnóstico de la neurocisticercosis / Cathepsin L Cysteine Protease from Taenia solium: Its biological role in the infection and potential use for the immunodiagnosis of neurocysticercosis

Taenia solium es un helminto aplanado responsable de la teniosis y de la cisticercosis humana, siendo esta última producida por el consumo de huevos infectivos. Los cisticercos pueden desarrollarse en diferentes tejidos del hombre, frecuentemente en el sistema nervioso central causando la neurocisticercosis (NCC). Para el diagnóstico de la NCC se requiere de una adecuada interpretación de datos clínicos, resultados de neuroimagen y pruebas serológicas. Sin embargo, las pruebas serológicas podrían mejorarse con el desarrollo de antígenos candidatos capaces de incrementar su sensibilidad y especificidad. En los últimos años se han descrito una serie de proteínas de superficie y de secreción de T. solium esenciales para la interacción parásito-hospedero. Una de estas familias son las cisteínoproteasas catepsinas L, las cuales cumplen un rol preponderante para el desarrollo y supervivencia del parásito, participando en la invasión tisular, la evasión de la respuesta inmune, el desenquistamiento y enquistamiento del cisticerco. Son consideradas como antígenos potenciales para el inmunodiagnóstico de la neurocisticercosis.

Taenia solium is a plane helminth responsible for taeniasis and human cysticercosis, the latter being the result of the consumption of infective eggs. Cysticerci can develop in different human tissues, often in the central nervous system, causing neurocysticercosis (NCC). For the diagnosis of NCC, an adequate interpretation of clinical data, neuroimaging results and serological tests are required. However, serological tests could be improved by developing candidate antigens able to increase their sensibility and specificity. In the last years, a series of surface and secretory proteins of T. solium essential for the parasite-host interaction have been described. One of these families is cathepsin L cysteine proteases, which have a predominant role in the development and survival of the parasite. They take part in the tissue invasion, immune response evasion, excystation and encystment of cysticercus. They are considered potential antigens for the immunodiagnosis of neurocysticercosis.

Aspectos moleculares de la resistencia a pirazinamida en M. tuberculosis: implicancias para el desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico y terapéutica / Molecular aspects of the resistance to pirazinamida in M. tuberculosis: implications for the development of new methods of diagnosis and therapeutics

Objetivo: Deseamos entender el polimorfismo del gen pirazinamidasa de M.tuberculosis en la población /peruana, y su correlación con las características ®estructura-función¼ de la enzima que codifica, para establecer los fundamentos moleculares del uso de técnicas de ADN para el diagnóstico de resistencia a PZA. Asimismo deseamos estudiar el efecto de altas concentraciones de Fe y Zn en la actividad enzimßtica de pncA como potenciadores de la terapia antituberculosa. Material y métodos: Hemos empleado la prueba MABA como la prueba referencia para comparar la técnica SSCP en la medición de la sus-ceptibilidada PZA. Adicionalmente hemos secuenciado el gen de pirazinamidasa de 20 cepas de M. tuberculosis y hemos determinado la actividad enzimßtica pirazinamidasa utilizando la prueba de Wayne. Para medir el efecto de los iones en la actividad enzimßtica, utilizamos la prueba de Wayne cuantitativa. Resultados: Hemos estudiado el polimorfismo del gen pncA utilizando secuenciamiento y el SSCP. Esta última técnica, sorprendentemente mostró unaimportante sensibilidad (92.9 por ciento y especificidad y un valor predictivo positivo de 93 por ciento para diagnosticar resistencia a PZA. Diversas mutaciones en el gen fueron detectadas en cepas resistentes a PZA,produciendo cambios de aminoßcidos asociados al sitio catalítico pero mayormente al sitio de coordinación del Zn, siendo la mutación D49N aparentemente la mßs prevalerte dentro de la población VIH positivos. Conclusiones: Las mutaciones mßs frecuentes asociadas a resistencia a PZA parecen afectar fundamentalmente la coordinación del Zn, frente a lo cual altas concentraciones de este ión, estimula la actividad pirazinamidasa, repotenciando el efecto de la PZA.